滤纸挑选克隆方法在筛选稳定表达细胞株中的应用

• 作者: 张燕青 张雅洁 谢晓斌 陈小卫 龙捷
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,单克隆 血管内皮生长因子C 基因表达 细胞系,肿瘤
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 801-804
• 分类号: R73-3
• 语种: 中文

摘要

目的:利用滤纸挑选克隆方法简单、有效地筛选稳定表达VEGF-C shRNA的乳腺癌MCF-7细胞株.方法:用已构建的表达VEGF-C shRNA的重组质粒裁体pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞,利用嘌呤酶素筛选阳性克隆;以滤纸法挑选阳性克隆并扩大培养成稳定表达的细胞株;荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测稳定表达的细胞株中VEGF-C的表达情况.结果:用滤纸法挑选并培养出的稳定表达细胞株中,VEGF-C的mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%,P<0.05.结论:利用滤纸挑选克隆方法成功筛选稳定表达VEGF-C shRNA的乳腺癌MCF-7细胞株,并将其命名为MCF-7/V-C.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雅洁	广州医学院病理教研室	54	405	11.0	18.0
2	谢晓斌	广州医学院病理教研室	22	73	5.0	7.0
3	陈小卫	广州市第一人民医院血液内科	14	48	4.0	6.0
4	龙捷	广州医学院病理教研室	25	76	5.0	7.0
5	张燕青	广州医学院病理教研室	12	72	5.0	8.0