稳定表达ALB启动子及荧光素酶报告基因的肝干细胞株的构建

• 作者: 何昀 张维玉 毕杨
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝干细胞 白蛋白启动子 荧光素酶报告基因 稳定细胞株
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-44
• 页数: 6页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 4626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.01.008

摘要

目的 构建稳定表达ALB启动子及荧光素酶报告基因的肝干细胞株.方法 PCR扩增获得ALB启动子,并与pBGLuc连接获得携带ALB启动子及荧光素酶报告基因的pBGLuc-ALB质粒,脂质体转染质粒到不同细胞,ALB-GLuc活性检测功能.构建逆转录病毒,感染HP14.5肝干细胞株获得携带ALB启动子及荧光素酶报告基因的稳定细胞株,经Dex、HGF体外诱导后第3、6、9、12天ALB-GLuc检测荧光素酶活性,免疫荧光检测ALB的表达.结果 PCR、酶切及测序结果显示ALB启动子正确插入至荧光素酶GLuc基因上游,HEK293、HP14.5、LC14d及Hepa1-6细胞中ALB-GLuc活性与免疫荧光结果一致.HP14.5 ALB-Gluc稳定细胞株在高浓度的稻瘟菌素中存活,免疫荧光结果显示Dex、HGF诱导后细胞中ALB的表达逐渐增强,并与ALB-Gluc活性升高一致.结论 成功构建了稳定表达ALB启动子及荧光素酶报告基因的肝干细胞株,为研究肝干细胞的体外成熟分化提供了重要的细胞手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何昀	重庆医科大学附属儿童医院干细胞研究中心	16	42	4.0	5.0
2	毕杨	重庆医科大学附属儿童医院干细胞研究中心	24	63	5.0	7.0
3	张维玉		2	21	2.0	2.0