衣原体GPIC噬菌体衣壳蛋白Vp2的克隆、表达和鉴定

• 作者: 侯淑萍 刘全忠 刘原君 姚卫锋 王惠平 齐蔓莉
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 衣原体噬菌体 Vp2蛋白 重组 表达
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 520-521,533
• 分类号: Q78|R691.3
• 字数: 1466字
• 语种: 中文

摘要

目的 获得衣原体GHC噬菌体衣壳蛋白Vp2基因及其蛋白.方法 提取噬菌体φCPG1及其核酸,用PCR技术扩增Vp2基因片段,再将其定位插入到原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达质粒.然后将重组表达质粒转化入大肠杆菌(BL-21)中,并用酶切分析、PCR扩增及部分序列测定等方法对重组质粒进行了鉴定.然后诱导表达,用SDS-PAGE及蛋白印迹进行鉴定.结果 所获得的Vp2基因片段经测序,长度为561bp,检索确认其序列与Genebank一致.对重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹均显示获得相对分子质量约32kDa的衣原体GPIC噬菌体衣壳蛋白Vp2.结论 成功表达了噬菌体衣壳蛋白Vp2,为进一步研究其作用机制和临床应用打下基础.