LRIG3基因特异性siRNA腺病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 包世新 叶章群 杨为民 袁晓奕
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: LRIG3基因 RNA干扰 腺病毒载体 膀胱癌
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R737.14|R34
• 字数: 3609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2010.01.005

摘要

目的 构建并鉴定针对LRIG3 基因的小干扰RNA(LRIG3-siRNA)腺病毒表达载体,为膀胱癌基因治疗的研究提供有效的实验工具.方法 设计可形成小发夹结构的LRIG3-siRNA模板cDNA 序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pSilencer-U6neo,构建LRIG3-siRNA表达质粒pSilencer-LRIG3.鉴定正确后,将pSilencer-LRIG3转染至HEK293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒pAd-LRIG3.大量扩增pAd-LRIG3,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.pAd-LRIG3 感染人膀胱癌细胞T24,RT-PCR法检测LRIG3 mRNA的表达.结果酶切分析、测序鉴定表明pSilencer-LRIG3构建成功,PCR分析表明pAd-LRIG3含有LRIG3-siRNA 序列.pAd-LRIG3可抑制 LRIG3 mRNA的表达.结论 含有LRIG3-siRNA 的重组腺病毒构建成功,且具有抑制LRIG3基因mRNA 表达的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶章群	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	497	4467	31.0	47.0
2	杨为民	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	226	1320	17.0	26.0
3	袁晓奕	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	25	119	4.0	10.0
4	包世新	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	11	26	3.0	4.0