PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立

• 作者: 于永扬 周总光 李园 杨烈 王存 王玲 蒋小
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化物酶体增殖因子活化受体δ 结直肠癌 RNA干扰 慢病毒 KM12C
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 400-406
• 页数: 7页
• 分类号: R735.34
• 语种: 中文

摘要

大肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和病死率正逐年递增.过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome pro1iferator-activated receptorδ,PPARδ)是结肠腺瘤性息肉基因通路的下游靶标,很可能参与了大肠癌发病机制.然而,目前对该基因在大肠癌中的功能尚未阐明.本实验采用慢病毒三质粒包装系统构建特异靶向人PPARδ基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARδ基因稳定沉默的结肠癌细胞株.测序证实,成功构建编码表达PPARδ短发夹结构RNA(sh-PPARδ)的慢病毒载体pLVshPPARδ以及对照载体pLVControl. 病毒载体转导结肠癌细胞株KM12C后,荧光显微镜及流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)证实细胞转染效率>90%,RT-PCR测定实验组KM12C细胞PPARδ的mRNA表达比未处理细胞下降70%,对照组与未处理细胞无显著差异.Western blot显示实验组PPARδ蛋白表达量比未处理细胞明显下降,对照组与未处理细胞无显著差异.结果显示成功构建特异靶向人PPARδ基因的RNAi慢病毒载体,并成功建立PPARδ表达稳定干扰的人结肠癌细胞株KM12C,为PPARδ在大肠癌中的功能研究提供了新的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周总光		189	1320	18.0	26.0
2	于永扬		48	402	13.0	18.0
3	王玲		111	310	10.0	12.0
4	王存		43	297	9.0	16.0
5	杨烈		26	172	6.0	12.0
6	李园		40	166	7.0	11.0
7	蒋小		3	40	1.0	3.0