hWAPL基因shRNA真核表达载体的构建及干扰效果的初步鉴定

• 作者: 康燕琴 张欣怡 曹利仙 潘巍巍 黄玉蓉
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人半翼基因 短发夹 RNA 细胞转染
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 446-450
• 分类号: R3
• 字数: 3450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2010.04.009

摘要

目的:构建针对人半翼基因(hWAPL)的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其转染效率.方法:根据hWAPL基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆到带有卡那抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,酶切和测序后,用脂质体转染到CasKi细胞中,观察荧光表达,鉴定转染效率.RT-PCR检测结果表明,筛选到的短链hWAPL siRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.结果:成功构建了表达shRNA的质粒及其阴性对照质粒,转染到CasKi细胞系中可以特异下调hWAPL mRNA表达,载体转染效率达50%以上.结论:RNAi能特异地下调CasKi细胞中hWAPL mRNA含量,抑制宫颈癌细胞恶性增殖,提示hWAPL可能成为宫颈癌基因治疗的一个新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹利仙	嘉兴学院医学院解剖学教研室	13	48	5.0	6.0
2	潘巍巍	嘉兴学院医学院解剖学教研室	17	43	4.0	6.0
3	黄玉蓉	嘉兴学院医学院解剖学教研室	1	6	1.0	1.0
4	张欣怡	嘉兴学院医学院解剖学教研室	1	6	1.0	1.0
5	康燕琴	嘉兴学院医学院解剖学教研室	1	6	1.0	1.0