产气肠杆菌fhlA基因克隆、表达及重组菌株产氢量

• 作者: 宋文路 张传溪 程军 赵锦芳
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 工学
• 关键词: 产气肠杆菌 fhlA 克隆 过量表达 发酵产氢
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 736-742
• 分类号: Q7|TQ116.29
• 语种: 中文

摘要

[目的]本研究以产氢细菌产气肠杆菌Enterobacter aerogenes ATCC13408为研究对象,克隆甲酸-氢裂解酶(formate hydrogen lyase,FHL)系统的转录激活蛋白FHL activator(fhlA)基因,构建过表达重组菌株,以提高菌株产氢效率.[方法]利用简并引物和Genome walking技术,克隆fhlA的全长基因,将该基因连接到改造质粒pGEX-4T-2-Cat中,电击转化得到重组菌株,用厌氧发酵方法测定重组细菌的产氢量.[结果]E.aerogenes ATCCl3408 fhlA ORF全长2073 bp,编码一个含690个氨基酸残基的蛋白(GenBank accession GU188474).SDS-PAGE和Western blot分析证明fhlA基因在重组菌中得到了融合表达.对重组后菌株的产氢量进行了测定,结果表明:底物产氢潜力由原来的1.23±0.08 mol H2/mol葡萄糖提高到了1.48±0.04 mol H2/mol葡萄糖,提高了20.36%.[结论]本研究首次克隆了E.aerogenes ATCC13408的fhlA基因,并将该基因在原菌中过量表达.重组后菌株的产氢量得到显著提高,为进一步研究和开发利用E.aerogenes ATCC13408的fhlA基因提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程军	浙江大学能源清洁利用国家重点实验室	122	1629	24.0	34.0
2	赵锦芳	浙江大学农业部作物病虫分子生物学重点开放实验室	19	52	5.0	6.0
4	张传溪	浙江大学农业部作物病虫分子生物学重点开放实验室	69	719	14.0	23.0
5	宋文路	浙江大学能源清洁利用国家重点实验室	5	2	1.0	1.0