6个布鲁氏菌蛋白的克隆、表达及纯化

• 作者: 李培锋 李晓楠 段越强 王希良 胡毅伟 赵忠鹏 赵晓燕
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 布鲁氏菌 重组蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 620-623
• 页数: 4页
• 分类号: R378.5
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含6个布鲁氏菌蛋白的原核表达载体,并对其重组蛋白进行诱导表达及纯化.方法 以羊种布鲁氏菌16M基因组DNA为模板扩增6个蛋白基因,与载体pET32a(+)连接,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导蛋白表达,SDSPAGE及Western blot鉴定,采用HisTrapTM HP纯化目的蛋白.结果 成功克隆了6个布鲁氏菌蛋白,经对表达条件进行优化,目的蛋白获得大量表达,纯化后纯度达90%以上.结论 获得了纯度较高的6个布鲁氏菌蛋白,为进一步研究其免疫原性及保护性奠定基础.