出血性大肠杆菌O157菌壳的制备研究

• 作者: 冯书章 刘军 刘爽 周博 李鹏 王文东 祝令伟 纪雪
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 出血性大肠杆菌 O157:H7 菌壳
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 672-675,679
• 分类号: R378
• 字数: 2931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.07.014

摘要

目的 利用温度控制噬菌体PhiX174裂解基因E的表达,制备出血性大肠杆菌O157:H7菌壳,鉴定其裂解效率并观察其形态.方法 利用PCR技术扩增得到噬菌体PhiX174裂解基因E并克隆到质粒pBV220中,将重组质粒导入出血性大肠杆菌O157:H7.重组菌株O157:H7(pBV220::E)培养温度从28℃突升至42℃,每20min检测菌液OD600值,绘制重组菌株生长曲线.体外菌落计数计算裂解效率,并通过电镜观察菌壳结构.结果 获得了PhiX174裂解基因E全长基因及重组质粒,构建了大肠杆菌的重组菌株.重组菌菌液OD600值在温度突升至42℃后40min后开始显著下降,80min后OD600值趋于平稳.细菌的裂解效率为98.4%.电子显微镜观察显示,经诱导后,O157:H7细菌内容物可以通过细菌表面的孔道流出,从而形成菌壳.结论 本研究成功制备了大肠杆菌O157:H7菌壳,为将来进一步研究O157菌壳的特性奠定了基础.