PIK3CA基因RNA干扰慢病毒载体的构建和鉴定

• 作者: 冯玉环 吴小华 易建平 李月红
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒属 PIK3CA RNA干扰 转染 293T
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1129-1131,1144
• 分类号: R34
• 字数: 3866字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建靶向PIK3CA(P110α)基因的RNA干扰慢病毒载体.方法 针对PIK3CA-mRNA(NM_006218)设计4个RNA干扰靶点序列和一个阴性对照靶点,构建慢病毒转移质粒pGCL-GFP.构建成功的RNA干扰质粒与PIK3CA表达质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观测转染效果,Western Blot检测PIK3CA蛋白表达,筛选出干扰效果最好的RNA干扰质粒.将该质粒与两种辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒并检测其滴度.结果 4个靶点和阴性对照靶点的RNA干扰质粒均构建成功;通过Western Blot检测获得最有效干扰靶点,并成功包装成滴度为2×108TU/ml的慢病毒.结论 成功构建可供感染的PIK3CA基因RNA干扰慢病毒载体,为进一步研究PIK3CA功能和用慢病毒进行卵巢癌基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易建平		8	121	3.0	8.0
2	吴小华	河北医科大学临床医学院白求恩国际和平医院妇产科	64	361	11.0	15.0
3	李月红		62	321	11.0	14.0
4	冯玉环		3	3	1.0	1.0