rAAV-hBMP2-GFP载体感染滴度测定方法的建立

• 作者: 代泉 姚天华 王敏 程政 郭秀全
• 来源期刊: 临床医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: rAAV-hBMP2-GFP AAV-HT1080细胞 感染滴度 测定
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 12-14
• 分类号: R392.1
• 字数: 2146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4659.2010.10.012

摘要

目的 建立携骨形态发生蛋白2基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-hBMP2-GFP)感染滴度测定的 方法 ,并制备高滴度的rAAV-hBMP2一GFP病毒液,为进一步实验hBMP2诱导大鼠牙槽骨骨缺损修复的基因治疗提供有利的工具. 方法 通过分析腺相关病毒-HT1080(AAV-HT1080)细胞接种量、培养时间及病毒吸附时间等参数,建立应用荧光计数法测定rAAV-hBMP2-GFP病毒感染滴度的 方法.并分析其精密性及检测病毒的稳定性. 结果 AAV-HT1080细胞的最佳接种浓度、培养时间及病毒吸附时间分别为3×105个/孔、24 h及48 h,在此条件下收获的病毒液的感染滴度最高可达3.82×1011/ml,所建立的荧光计数检测 方法 精密性较好.制备的病毒液的平均感染滴度为3.60 X 1011/ml,4℃和37 ℃保存7 d及反复冻融5次,稳定性良好. 结论 建立了rAAV-hBMP2-GFP感染滴度的测定 方法 ,并制备了高滴度及滴度稳定的rAAV-hBMP2-GFP病毒液.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚天华		19	111	7.0	10.0
2	王敏		108	817	14.0	26.0
3	程政		13	44	5.0	6.0
4	代泉		5	17	2.0	4.0
5	郭秀全		2	8	1.0	2.0