HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定

• 作者: 刘宏利 吴玉章 曾兴光 石统东 谢谆怡 邹丽云 韩俊峰
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 不连续蔗糖梯度离心 纯化 树鼩肝细胞
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 340-343
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法.方法 在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖.PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000 g纯化后的HBV超微形态;70 000 g纯化后的HBV颗粒感染树嗣肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性.结果 100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000 g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000 g还提高3.7倍多.电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞.结论 70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴玉章		325	1583	17.0	22.0
2	石统东		19	87	6.0	8.0
3	邹丽云		64	278	10.0	13.0
4	韩俊峰		15	65	4.0	8.0
5	谢谆怡		10	67	4.0	8.0
6	刘宏利		7	12	2.0	3.0
7	曾兴光		5	10	2.0	3.0