口蹄疫病毒O/HN/93疫苗株的拯救及病毒活性鉴定

• 作者: 刘在新 卢曾军 孙普 曹伟军 李平花 白兴文
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 口蹄疫病毒 疫苗株 感染性 cDNA 克隆 病毒拯救
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 32-37
• 分类号: Q78
• 字数: 4517字
• 语种: 中文

摘要

利用定点突变方法,构建含有预期突变的口蹄疫病毒O/HN/93株全长cDNA克隆,将全长cDNA的重组质粒线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,转染细胞盲传至第3代50 h后出现典型致细胞病变效应(CPE),第4代10 h出现典型的CPE.对收获的病毒分别用RT-PCR、分子标签测序、间接免疫荧光和电镜观察等进行鉴定,均证实成功拯救到了O/HN/93株FMDV.成功获得O/HN/93株的感染性分子克隆,为进一步研究抗原谱广、免疫原性好的候选疫苗株奠定了骨架基础.