野生型MLK3真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 侯筱宇 岳军 杜彩萍 金磊
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: MLK3 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: R34|R743
• 字数: 3236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2010.02.006

摘要

目的 构建野生型MLK3真核表达质粒并转染至COS-7细胞中表达.方法 以大鼠海马总RNA为模板,通过RT-PCR分段扩增MLK3的序列,采用酶切、链接的方法先将目的基因克隆至pGEM-T,筛选正确的质粒后,再亚克隆至pcDNA3.1(+).以脂质体转染法将构建好的重组质粒转染至COS-7细胞,通过免疫印迹鉴定重组质粒的表达.结果 限制性内切酶酶切和测序结果表明,扩增出的野生型MLK3的序列正确.免疫印迹显示,转染的重组质粒在相对分子质量92×103处有相应条带出现.结论 成功构建了MLK3的真核表达质粒,重组质粒在COS-7细胞中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金磊	江苏省脑病生物信息重点实验室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	1	0	0.0	0.0
2	岳军	江苏省脑病生物信息重点实验室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	1	0	0.0	0.0
3	杜彩萍	江苏省脑病生物信息重点实验室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	3	1	1.0	1.0
4	侯筱宇	江苏省脑病生物信息重点实验室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	7	1	1.0	1.0