猪乳铁蛋白基因的克隆及其重组乳酸菌表达系统构建

• 作者: 乔薪媛 刘荻荻 单安山 哈卓 唐丽杰 姜艳萍 宗晓淋 李一经 葛俊伟 赵丽丽
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪乳铁蛋白 乳酸菌 表达载体系统
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 79-84
• 分类号: S823
• 字数: 3691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2010.03.017

摘要

根据猪乳铁蛋白N端基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,以泌乳3日龄母猪乳腺组织RNA为模板,进行RT-PCR,获得含有猪乳铁蛋白基因N端1 077 bp目的片段,将其与表达栽体质粒pPG612.1进行连接,通过转化进入宿主菌JM109细胞内,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定分析,表明猪乳铁蛋白N端PLF<N,>基因已成功插入到表达载体质粒中,获得了猪乳铁蛋白干酪乳杆菌表达载体质粒pPG612-PLF_N.将获得的重组质粒再分别电转化入干酪乳杆菌ATCC393、植物乳杆菌KLDS1.0344、副干酪乳杆菌KLDS1.0652及戊糖乳杆菌KLDS1.0413中,获得表达猪乳铁蛋白基因的多种重组乳酸菌分别为_PPG612-PLF_N/L.casei,pPG612-PLF_N/L.plantarum,pPG612-PLF_N/L.paracasei和pPG612-PLF<N>/L.pentosus.,为猪乳铁蛋白的乳酸菌表达及重组乳酸菌抗菌制剂的制备奠定了基础.