正交优化多重PCR反应体系检测3种食源性致病菌的研究

• 作者: 孙皆宜 张伟 李艾 杨国兴 郝玉芹
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 多重PCR 食源性致病菌 检测 FTA滤膜
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 602-605
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.02.019

摘要

[目的]建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌的快速、敏感、特异的多重PCR检测方法.[方法]根据金黄色葡萄球菌的nuc基因、沙门氏菌的IpaB基因、志贺氏菌的ipaH基因,设计3对特异性引物进行多重PCR检测,利用正交设计对多重PCR反应体系的镁离子、Taq酶、dNTP、引物的浓度在4个水平上进行L_(16)(4~4)优化试验,并确定该检测方法的特异性与灵敏度.[结果]3对引物能特异性扩增出210、280、393 bp的目的条带.利用FTA滤膜提取模板DNA,采用建立多重PCR同时对3种食源性致病菌进行检测具有较高的灵敏度,灵敏度金黄色葡萄球菌为3.5×10~2cfu/ml、沙门氏菌为2.2×10~2cfu/ml、志贺氏菌为1.0×10~2cfu/ml.[结论] 该检测方法准确、快速、高效,为同时检测食品中多种致病菌奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	河北农业大学食品科技学院	241	2103	25.0	35.0
2	郝玉芹	唐山学院基础教学部	17	43	2.0	6.0
3	李艾	唐山学院环境与化学工程系	22	116	5.0	10.0
4	孙皆宜	唐山学院基础教学部	34	110	6.0	9.0
5	杨国兴		2	28	1.0	2.0