SYBR Green实时定量PCR检测转基因大豆中外源基因拷贝数

• 作者: 冀志庚 张明辉 敖金霞 霍楠 高学军
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: real-time PCR SYBR Green I 转基因大豆 拷贝数 Lectin 35边界序列
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-15
• 分类号: S565.1|Q78
• 字数: 2673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2011.10.003

摘要

采用SYBR Green I real-time PCR方法检测转基因大豆中外源基因35S边界基因的拷贝数,以大豆凝集素基因(Lectin)作为内参照基因,以转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,初始浓度为0.43μg·μL-1,进行5倍梯度稀释得到内参照基因CT值与起始模板量的相关性标准曲线:y=-2.9915x+22.3321,R2=0.996；以含35S边界序列的质粒DNA为目的基因为标准品,初始浓度为0.64μg· μL-1,同样进行5倍梯度稀释,建立目的基因CT与起始模板量的相关性标准曲线:y=-3.4021x+ 17.7219,R2=0.999.通过SYBR Green I real-time PCR获得样本中目的基因和内参基因的CT值,将CT值分别代入标准曲线计算该样本中内参基因和目的基因起始模板量,目的基因与内参基因起始模板量比值即是目的基因在该转基因中的拷贝数.计算结果为4份样品中,2个拷贝的1个,3个拷贝的3个.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高学军	东北农业大学生命科学与生物技术研究中心	183	1315	18.0	27.0
2	敖金霞	东北农业大学生命科学与生物技术研究中心	12	216	7.0	12.0
3	张明辉	东北农业大学生命科学与生物技术研究中心	10	154	6.0	10.0
4	冀志庚	东北农业大学生命科学与生物技术研究中心	3	43	3.0	3.0
5	霍楠	东北农业大学生命科学与生物技术研究中心	1	10	1.0	1.0