禽流感DNA疫苗重组质粒组织分布的实时荧光定量PCR方法建立

• 作者: 姜永萍 彭广能 李俊平 熊杰 王国俊 陈化兰
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感 DNA疫苗 组织分布 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 203-207
• 分类号: S852.65
• 字数: 2878字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.03.09

摘要

为研究禽流感病毒(AIV)DNA疫苗重组质粒在组织中的分布情况,本研究以AIV DNA疫苗pCAGGoptiHA5 HA基因为检测对象,分别建立检测AIV DNA疫苗重组质粒的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法和TaqMan MGB实时定量PCR方法.经优化比较两种方法的特异性、敏感性、重复性和污染率.结果表明,两种方法的标准曲线线性关系均较好,相关系数均达到0.999;最低检测量为42 copies,特异性强;探针法的重复性优于染料法,污染率低于染料法,因此采用TaqMan MGB实时定量PCR方法检测AIV DNA疫苗重组质粒组织分布情况.