PRRSV新疆株N基因原核表达条件的优化及蛋白纯化

• 作者: 买买提艾力·斯迪克 冉多良 张伟 沙娜瓦尔·塔希 王传锋
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV N基因 条件优化 融合蛋白纯化 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 1110-1114
• 分类号: S852.65+1
• 字数: 3730字
• 语种: 中文

摘要

[目的]获得重组表达质粒pGEX-6P-N在大肠杆菌BL21中高效表达,分析表达蛋白的免疫学活性及纯化后蛋白的浓度.[方法]通过优化诱导剂终浓度和诱导时间来实现融合蛋白的高效表达,使用BCA法测定蛋白浓度,利用Western blotting分析融合蛋白的免疫学活性.[结果]融合蛋白在37℃条件下,经终浓度为1.2 mmol/L的IPPG诱导表达4.5 h后获得了较高的表达水平.纯化后的融合蛋白经BCA法测定蛋白浓度达到0.587 mg/mL.Western blotting试验表明,GST-N蛋白能与抗PRRSV阳性血清发生特异性反应.[结论]为建立N特异性抗体的间接ELISA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础,为新疆PRRS的防控提供了理论支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冉多良	新疆农业大学动物医学学院	125	564	11.0	18.0
2	张伟		4	3	1.0	1.0
3	买买提艾力·斯迪克		7	10	1.0	3.0
4	沙娜瓦尔·塔希		8	11	1.0	3.0