用Fugene6制作高滴度慢病毒方法的优化比较

• 作者: 李思光 潘晓静 范霖 路建伟 马志昭 高山峨
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 慢病毒 滴度 Fugene6
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 385-390
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

针对实验室中比较普遍的包装的慢病毒滴度不高的问题,我们对慢病毒包装过程中的几个关健步骤进行了优化.采用Fugene6同时转染携带GFP的质粒和包装慢病毒所必需的包装质粒进入293T细胞中.通过使用荧光显微观察GFP的表达亮度及流式细胞技术测量GFP阳性细胞的比例来测定病毒滴度.通过优化Fugene6和DNA的比例,发现当Fugene6和DNA的比例是3:1时获得的慢病毒的滴度最高;通过对转染后收获病毒的时间的比较,发现转染48小时后回收所得到的慢病毒滴度最高.