拟蜘蛛拖丝蛋白基因重组蛋白的纯化及其抗血清制备

• 作者: 安铁洙 张志人 朴善花 王春生 罗芳 赵健灵
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜘蛛拖丝蛋白 原核表达 蛋白纯化 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 506-509
• 分类号: Q51|Q78
• 字数: 3254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2011.04.006

摘要

为了制备可用于拟蜘蛛拖丝蛋白体外检测的抗血清,利用前期工作中获得的蜘蛛拖丝蛋白基因重组原核表达载体2S-pET-52b( + ),采用原核表达方法获得大量重组蜘蛛拖丝蛋白2S-His,对此重组蛋白进行His标签特异性的亲和纯化,再依次经SDS-PAGE、切胶和与佐剂混合后作为抗原;皮下多点注射法将抗原注入新西兰大白兔皮下进行免疫;采集已免疫的兔血清,采用ELISA检测方法对其效价进行检测.结果 显示,重组质粒2S-pET-52b( + )转化BL21-pLysS后获得最佳的表达菌株;在筛选得到的最佳IPTG、温度和时间(分别为1.0 mmol/L、30℃和2 h)条件下诱导获得2S-His重组蛋白;经免疫的4只兔血清中,2只兔的血清效价达1:25 600和1:12 800.表明利用2S-pET-52b( + )重组质粒成功获得可用于拟蜘蛛拖丝蛋白体外检测的抗血清.本研究为加快建立在被毛中特异表达大量蜘蛛拖丝蛋白的新方法提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安铁洙	东北林业大学生命科学学院	75	199	8.0	10.0
2	王春生	东北林业大学生命科学学院	61	134	7.0	9.0
3	朴善花	东北林业大学生命科学学院	53	94	5.0	7.0
4	张志人	东北林业大学生命科学学院	5	15	1.0	3.0
5	罗芳	东北林业大学生命科学学院	5	24	3.0	4.0
6	赵健灵	东北林业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0