肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析

• 作者: 冉旭华 刘娣 孙中武 李晓娟 王密 王春仁 闻晓波
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肝片吸虫 GST基因 真核表达 活性分析
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1005-1007
• 分类号: S383.2
• 字数: 2011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.11.013

摘要

目的 构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性.方法 以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况.结果 重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应.结论 肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究.