斑马鱼心脏发育标记基因Wnt11的多克隆抗体制备

• 作者: 万永奇 吴秀山 李志 江志钢 王华 袁婺洲 雷孝锋
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: Wnt11 融合蛋白 斑马鱼 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 107-110
• 分类号: Q71
• 字数: 3094字
• 语种: 中文

摘要

Wnt11为Wnt家族的成员,是参与Wnt信号途径调控的转录因子,对心脏的正常发育起着非常重要的作用.根据已报道的Wnt11基因序列,通过RT-PCR从斑马鱼心脏组织中得到Wnt11部分编码区序列,将其连接到pGEX-4T-1原核表达载体上.经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功,将重组质粒(pGEX-4T-Wnt11)转化E.coli BL21,通过IPTG诱导表达出融合蛋白,采用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Wnt11原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Wnt11多克隆抗体,为Writ11功能的进一步研究奠定了基础.