猪源TTV Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

• 作者: 于海 侯军委 周艳君 李国新 王礞礞 童光志
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: TTV1 TTV2 Taqman实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 13-19
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 3737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.02.004

摘要

根据TTV1和TTV2的非编码区（UTR）的保守序列分别设计并合成两套特异性引物和Taqman探针,建立了鉴别TTV1和TTV2的Taqman实时荧光定量PCR方法。通过常规PCR方法分别克隆TTV1和TTV2的非编码区（UTR）的保守序列并将其连入pMD18-T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品分别绘制标准曲线,TTV1标准曲线的相关系数为0.984,TTV2标准曲线的相关系数为0.994。检测结果显示,两种方法的灵敏度均可达10 copies/μL,除猪源TTV外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪2型圆环病毒、猪流感病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好,批内和批间变异系数均小于3%。检测采集自广西和内蒙古的44份病料,TTV1的阳性率为47.73%,TTV2阳性率为70.45%,TTV1和TTV2混合感染的阳性率为31.82%。猪源TTV检测方法的建立为该病毒的流行病学调查和定量提供了有效的手段。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志	中国农业科学院上海兽医研究所	168	2158	24.0	40.0
2	周艳君	中国农业科学院上海兽医研究所	54	442	10.0	19.0
3	李国新	中国农业科学院上海兽医研究所	29	408	10.0	20.0
4	王礞礞	中国农业科学院上海兽医研究所	18	90	5.0	9.0
5	于海	中国农业科学院上海兽医研究所	18	89	6.0	8.0
6	侯军委	中国农业科学院上海兽医研究所	2	24	2.0	2.0