华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘淑会 庞玉辉 武军 王玉卿 赵继新 陈新宏 降彦苗
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 华山新麦草 α-醇溶蛋白 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1533-1542
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白.[方法]采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草仅α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a(+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达.[结果]从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因:Gli-Ns-2(FJ713595)、Gli-Ns-3(GQ139525)、Gli-Ns-4(G0139526)和Gli-Ns-5(GQ139527).序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因.利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达.Western-blot证实融合蛋白可成功表达.[结论]克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈新宏	西北农林科技大学农学院	55	480	13.0	18.0
2	赵继新	西北农林科技大学农学院	57	501	13.0	19.0
3	武军	西北农林科技大学农学院	51	477	13.0	19.0
4	刘淑会	西北农林科技大学农学院	34	233	11.0	13.0
5	庞玉辉	西北农林科技大学农学院	15	109	6.0	10.0
6	王玉卿	西北农林科技大学农学院	1	5	1.0	1.0
7	降彦苗	西北农林科技大学农学院	1	5	1.0	1.0