大肠杆菌分子伴侣表达的辅助载体构建及应

• 作者: 亓振国 张宽亮 程备久 范军 陈宗梅
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 分子伴侣 大肠杆菌 辅助载体 构建 应用
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 研究资源
• 页码范围: 171-177
• 分类号: S8
• 字数: 5122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.01.025

摘要

异源蛋白在大肠杆菌不能正确折叠表达成包涵体,分子伴侣能在细胞内帮助异源蛋白折叠,改善蛋白的聚集.本研究以大肠杆菌(Escherichia coli) DH5α菌株DNA为模板,利用PCR技术扩增出6个分子伴侣编码基因groEL、groES、dnaK、dnaJ、grpE和clpB,分别将groEL,groES和grpE( I组)插入pCDFDuet-1载体,将dnaK、dnaJ和c1pB( II组)基因插入pRSFDuet-1,构建辅助载体pR-GESP和pC-DJKL,每个重组载体中含有一个人工操纵子,每个基因上游含有T7启动子.SDS-PAGE结果显示,诱导后的重组大肠杆菌上清除了DnaJ外其它5个蛋白明显表达.SDS-PAGE分析了共表达分子伴侣对玉米(Zea mays)四毗咯分子合成的谷氨酸-1-半醛氨基转移酶、尿卟琳原III脱羧酶和西罗叶绿三酸:铁鳌合酶在大肠杆菌的折叠和聚集影响,结果显示,GroEL、GroES和GrpE能防止玉米西罗叶绿三酸:铁鳌合酶在大肠杆菌的聚集,但DnaK、DnaJ和C1pB分子伴侣对该酶则没有作用;GroEL、GroES和GrpE能部分抑制玉米谷氨酸-1-半醛氨基转移酶在大肠杆菌的聚集,但是对改变玉米尿叶啉原III脱羧酶的聚集没有明显作用,这些结果表明,不同分子伴侣组对改善本研究选择的3个玉米蛋白在大肠杆菌可溶性表达的效果有差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	亓振国	安徽省作物生物学重点实验室安徽农业大学生命科学学院	3	18	3.0	3.0
2	张宽亮	安徽省作物生物学重点实验室安徽农业大学生命科学学院	2	15	2.0	2.0
3	程备久	安徽省作物生物学重点实验室安徽农业大学生命科学学院	3	16	2.0	3.0
4	陈宗梅	安徽省作物生物学重点实验室安徽农业大学生命科学学院	1	12	1.0	1.0
5	范军	安徽省作物生物学重点实验室安徽农业大学生命科学学院	3	16	2.0	3.0