牛精液中基因I型牛病毒性腹泻病毒荧光探针定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 于学辉 员丽娟 季新成 张彦明 曾新强 段晓东 牛国辉 黄玲
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛精液 基因I型BVDV 荧光定量RT-PCR检测 血清抗体检测
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 45-49
• 分类号: S852.65
• 字数: 3547字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.01.11

摘要

为建立牛精液中基因I型牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)的快速检测方法,本研究采用Sephycral S-400凝胶对牛精液过滤处理后提取病毒核酸,根据BVDV-1 5'UTR保守区基因序列,设计特异性引物和荧光探针,通过反应条件的优化,建立了牛精液中BVDV-1荧光定量RT-PCR检测方法.该方法可以检测到牛精液中含量为0.0125 TCID50的病毒,灵敏度比病毒分离方法高200倍～2000倍,比常规RT-PCR方法高10倍.对从同一个牛场6个月内采集的120份新鲜牛精液和40份冷冻牛精液用该荧光RT-PCR方法检测,没有检测到BVDV-1阳性样品.对其中的10头牛定期检测精液中病毒的同时,并同步检测了全血中的病毒和血清抗体,结果血清抗体阳性牛精液中没有检测到病毒,本研究结果表明,不能以血清抗体阴阳性做为精液是否带毒的依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
2	季新成		42	156	7.0	8.0
3	黄玲		18	150	6.0	11.0
4	于学辉		18	66	5.0	7.0
5	段晓东		6	40	4.0	6.0
6	员丽娟		11	57	5.0	7.0
7	牛国辉		3	24	3.0	3.0
8	曾新强		3	15	2.0	3.0