驯鹿β-防御素-1(reBD-1)基因的原核表达及蛋白活性的鉴定

• 作者: 景岚 曹贵方 杨银凤 苏丽娜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 驯鹿 防御素 基因克隆 蛋白表达 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1638-1642
• 分类号: S825|Q786
• 字数: 3930字
• 语种: 中文

摘要

旨在构建驯鹿β防御素-1(Reindeerβ-defensin-1,reBD-1)基因的原核表达载体pET-32a(+ )/reBD-1,诱导reBD-1融合蛋白在大肠杆菌中表达,并对其表达产物的生物学活性进行评价.利用RT-PCR技术扩增reBD-1前原肽.从重组克隆载体PMD19T/reBD-1中扩增reBD-1成熟肽编码基因,并克隆入pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21 (DE3)中用IPTG诱导表达reBD-1融合蛋白.表达的融合蛋白扩大培养,进一步纯化后进行体外抑菌试验.结果表明,reBD-1前原肽和成熟肽扩增产物大小分别为215和138 bp,目的基因的序列与驯鹿防御素-1 mRNA序列同源性为100％.前原肽和成熟肽融合蛋白分子量分别为28和24 ku.利用琼脂糖扩散法表明,0.08 mg·mL-1的纯化成熟肽蛋白对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的活性有明显抵抗作用.结果显示,reBD-1前原肽及成熟肽在大肠杆菌中得到了高效表达,其成熟肽对革兰氏阳性菌和阴性菌的活性有抗性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹贵方	内蒙古农业大学兽医学院	110	300	7.0	11.0
2	杨银凤	内蒙古农业大学兽医学院	66	312	10.0	13.0
3	景岚	内蒙古农业大学农学院	52	289	9.0	13.0
4	苏丽娜	内蒙古农业大学兽医学院	2	10	2.0	2.0