病毒巨噬细胞炎性蛋白-Ⅱ在毕赤酵母中的表达及其抗HIV-1活性

• 作者: 孙晗笑 张光 李秀英 莫雪梅 贾忠伟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病毒巨噬细胞炎性蛋白-Ⅱ 毕赤酵母 HIV-1
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 629-633
• 分类号: R373.9|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 在毕赤酵母中表达病毒巨噬细胞炎性蛋白-Ⅱ(Viral macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ),并检测其抗HIV-1活性.方法 通过PCR技术从质粒pQE-vMIP-Ⅱ中扩增vMIP-Ⅱ基因,插入酵母表达载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-vMIP-Ⅱ,转化毕赤酵母菌X33,甲醇诱导表达.表达产物经镍离子亲和层析和分子筛层析纯化后,进行Western blot 鉴定,并检测重组vMIP-Ⅱ蛋白对HIV-1诱导的细胞合胞体形成的抑制作用.结果 重组表达质粒pPICZaA-vMIP-Ⅱ经酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组vMIP-Ⅱ蛋白的相对分子质量约为8 500,以分泌形式表达于重组酵母菌的发酵上清中;纯化的重组蛋白纯度达97.3%,且可与HRP标记的vMIP-Ⅱ多克隆抗体发生反应;重组vMIP-Ⅱ蛋白组的合胞体数目明显少于阳性对照组(P＜0.05),其IC50值为1.35 ng/ml.结论 已成功在毕赤酵母中表达了重组vMIP-Ⅱ蛋白,其具有较强的抑制HIV-1的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫雪梅	暨南大学药学院基因组药物研究所	29	63	5.0	6.0
2	孙晗笑	暨南大学药学院基因组药物研究所	61	266	7.0	13.0
3	李秀英	暨南大学药学院基因组药物研究所	29	50	5.0	5.0
4	张光	暨南大学药学院基因组药物研究所	23	65	5.0	7.0
5	贾忠伟	暨南大学药学院基因组药物研究所	2	1	1.0	1.0