化学渗透法破碎基因重组E.coli提取重组人SOD包含体和复性

• 作者: 刘建荣 王慧 赵晓瑜 静天玉
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人超氧化物歧化酶 化学渗透 细胞破碎 包含体 复性
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 96-102
• 分类号: Q55
• 字数: 5122字
• 语种: 中文

摘要

以化学渗透法破碎重组大肠杆菌细胞释放重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)包含体并对其复性.选择四种化学试剂(Triton X-100、EDTA、NaOH和SDS)对rhSOD重组大肠杆菌细胞进行破碎实验,以SDS-PAGE检测破菌效果,结果0.5%Triton X-100和10 mmol·L-1 EDTA可以较好地破碎重组大肠杆菌细胞,所提取的包含体溶解液纯度与超声法相近,可达65%左右.采用透析法复性包含体,尿素终浓度0.1 mol·L-1时rhSOD包含体复性效果优于1.0 mol·L-1,比活分别为:Triton法2800 U·mg-1,EDTA法3200 U·mg-1,超声法2800 U·mg-1,复性rhSOD纯度达85%左右.本研究建立的用于破碎重组大肠杆菌释放rhSOD包含体的Triton法和EDTA法,包含体复性后比活等于或高于超声法,与机械破菌法相比,简便有效,成本低廉,无需特殊破菌设备,为放大规模破菌提取重组大肠杆菌包含体和复性奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵晓瑜	河北大学生物技术研究中心	83	757	15.0	23.0
3	刘建荣	河北大学生物技术研究中心	30	163	6.0	12.0
5	王慧	北京师范大学生命科学学院	33	85	5.0	8.0
6	静天玉	河北大学生物技术研究中心	20	170	7.0	12.0