红细胞生长刺激蛋白二硫键定位连接方式的测定

• 作者: 何昆 刘炳玉 李萍 杨松成 桑志红 王鸿丽 薛燕 赵永强
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 红细胞生长刺激蛋白 基质辅助激光解吸附电离质谱 肽质量指纹图谱 二硫键
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 700-704
• 分类号: Q502
• 字数: 2807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.05.023

摘要

目的:建立红细胞生长刺激蛋白(ESP)的二硫键连接方式的测定方法.方法:先将红细胞生长刺激蛋白的糖链用糖苷酶切除,再分别对ESP和还原烷基化后ESP用胰蛋白酶进行酶切,然后用MALDI-TOF测得该蛋白质的肽质量指纹图谱,通过比较还原烷基化前后各肽质量指纹图谱,找到差异肽段的分子离子峰[M+H]+,通过比对该蛋白理论酶切肽的[M+H]+,确定二硫键的连接方式.结果:ESP有4个半胱氨酸,通过比较还原烷基化前后的肽质量指纹图谱定位二硫键的位置为Cys7-Cys161和Cys29-Cys33.与理论上的二硫键连接相符.结论:建立了酶切结合质谱法测定蛋白质二硫键定位的方法,为今后生物技术产品的二硫键连接方式的质量控制提供了有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鸿丽		20	37	4.0	5.0
2	李萍		20	46	4.0	5.0
3	赵永强		8	16	2.0	3.0
4	杨松成		24	108	6.0	9.0
5	何昆		23	99	5.0	9.0
6	桑志红		7	8	2.0	2.0
7	刘炳玉		17	42	3.0	6.0
8	薛燕		12	19	2.0	3.0