GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化

• 作者: 周庆峰 张怡 张红绪 李成伟 贾孟
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: Exendin-4 融合蛋白 可溶表达 亲和纯化
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 155-159
• 分类号: Q78
• 字数: 3396字
• 语种: 中文

摘要

为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4.经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同浓度的IPTG和不同温度诱导下,经SDS-PAGE分析鉴定,表达出Mr约为30 kD的目的蛋白,灰度扫描显示目的蛋白占菌体总蛋白的29.9%,超声裂解后的上清通过Sepharose 4B亲和层析纯化、透析、除盐及冷冻干燥得到高纯度的目的蛋白.本研究成功制备了高纯度的GST-Exendin-4融合蛋白,为下一步进行目的蛋白大规模的生产打下了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张红绪	河南师范大学生命科学学院	49	228	9.0	11.0
2	周庆峰	商丘师范学院生命科学系	37	106	6.0	9.0
3	贾孟	商丘师范学院生命科学系	4	11	2.0	3.0