靶向Y-box结合蛋白-1基因的shRNA质粒的构建及鉴定

• 作者: 匡文斌 孔飞飞 成凤 涂植光 邱欣欣 钟梁 陈光辉
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: YB-1基因 RNA干扰 乳腺肿瘤
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1413-1416
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建靶向Y-box结合蛋白-1(Y-box binding protein-1,YB-1)基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒并鉴定其抑制率.方法 设计并合成3对针对YB-1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒pGenesil-1连接,构建3个重组质粒pGSi1、pGSi2和pGSi3,脂质体法转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,通过荧光定量PCR和Western blot分别检测细胞中YB-1基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平.结果 重组质粒pGSi1、pGSi2和pGSi3经酶切及测序证明构建正确；转染MDA-MB-231细胞后,YB-1基因在mRNA和蛋白水平的表达均降低,其中pGSi2的抑制效果最好,在mRNA和蛋白水平的抑制率分别为57.4％和90％.结论 成功构建了靶向YB-1基因的shRNA表达质粒,并筛选出1种对YB-1基因有显著抑制作用的shRNA,为进一步研究YB-1对乳腺癌细胞侵袭、迁移和多药耐药性的影响奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟梁	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	24	100	5.0	8.0
2	涂植光	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	172	1533	19.0	32.0
3	孔飞飞	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	4	19	2.0	4.0
4	陈光辉	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	3	7	2.0	2.0
5	邱欣欣	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	3	7	2.0	2.0
6	匡文斌	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	4	11	2.0	3.0
7	成凤	重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室	6	23	3.0	4.0