JTV1基因真核表达质粒的构建及其在K562细胞中的表达

• 作者: 刘北忠 吴燕 朱丹 王春光 王翀 金丹婷 钟梁 高艳军 黎亮
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: JTV1基因 真核细胞 基因表达 K562细胞 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 41-44
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建JTV1基因真核表达质粒并稳定转染人白血病细胞系K562,检测转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平及其对K562细胞增殖的影响.方法 从人外周血单个核细胞中克隆JTV1基因,并将其插入pcDNA3.1表达载体中,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1,经脂质体介导转染K562细胞,采用RT-PCR和Western blot法鉴定转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测JTV1稳定表达对K562细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1经双酶切及测序证实,目的 基因已插入质粒中;人JTV1基因能在K562细胞中稳定表达;JTV1具有抑制K562细胞增殖的作用.结论 已成功构建了JTV1基因真核表达质粒,并获得了稳定表达人JTV1基因的K562细胞克隆,为进一步研究人JTV1基因的功能及其与白血病细胞增殖及凋亡的相关性提供了细胞模型.