基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取       
摘要:
目的 构建表达下游调控元件的拮抗分子(DREAM)基因序列特异性的短发卡RNA(shRNA)质粒载体,检测其对C6细胞DREAM基因的干扰作用,为研究DREAM基因功能提供有力工具.方法 为了构建pRNAT-U6.1/Neo载体介导DREAM shRNA表达的质粒,针对DREAM的19碱基大小的片段,分别设计3对寡核苷酸和1条非特异性阴性对照序列,形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pRNAT-U6.1/Neo载体(命名为pRNAT-DREAM),两对DNA双链连接后形成中间由9个碱基序列间隔的反向互补序列,构建成能产生DREAM shRNA的质粒.用构建成功的4条质粒转染C6细胞,分别采用Realtime PCR和蛋白印迹检测其DREAM基因的mRNA和蛋白表达.结果 酶切、连接后构建成的质粒,经酶切与测序证实构建成功,无任何碱基突变.在培养的神经胶质细胞中转染率为85%左右,pRNAT-DREAM-Ⅱ和pRNAT-DREAM-Ⅲ显著抑制DREAM基因的表达.结论 成功构建了能表达DREAM shRNA的质粒载体pRNAT-DREAM-Ⅱ、pRNAT-DREAM-Ⅲ,此项研究结果 为DREAM信号通路的深入研究奠定了基础.
推荐文章
携带DREAM基因小分子干扰RNA重组质粒的构建
转录因子
DREAM
重组质粒
RNA干扰
组织工程
靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定
髓细胞白血病-1 基因
Raw264.7 细胞
THP-1 细胞
结核分枝杆菌
短发夹 RNA
短发夹RNA对前列腺癌细胞中PIM-1基因沉默效应的研究
前列腺肿瘤
细胞系,肿瘤
RNA干扰
RNA,小分子干扰
基因表达
脂质体
胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因ShRNA质粒表达载体的构建
Survivin基因
RNA干扰
短发夹RNA
胰腺癌细胞
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数  
(/次)
(/年)
文献信息
篇名 DREAM短发卡质粒载体的构建及在C6细胞中沉默DREAM基因的效应
来源期刊 中国现代医学杂志 学科 医学
关键词 RNA干扰 下游调控元件拮抗分子 质粒 栽体
年,卷(期) 2011,(10) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1129-1134,1139
页数 7页 分类号 R34
字数 4862字 语种 中文
DOI
五维指标
传播情况
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献  (0)
共引文献  (0)
参考文献  (0)
节点文献
引证文献  (0)
同被引文献  (0)
二级引证文献  (0)
2011(0)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(0)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
RNA干扰
下游调控元件拮抗分子
质粒
栽体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国现代医学杂志
半月刊
1005-8982
43-1225/R
大16开
湖南省长沙市湘雅路87号
42-143
1991
chi
出版文献量(篇)
24199
总下载数(次)
6
总被引数(次)
119228
  • 期刊分类
  • 期刊(年)
  • 期刊(期)
  • 期刊推荐
论文1v1指导