FAAP的原核表达、纯化与抗体制备

• 作者: 丁乃峥 刘新发 李镇安 王丽 王行明 郭海峰 郭红山
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠FAAP基因 原核表达 蛋白纯化,western blotting 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（25）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3082-3086,3090
• 页数: 6页
• 分类号: Q71
• 字数: 4354字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pET28a-FAAP-His原核表达载体,表达His-FAAP融合蛋白,制备FAAP蛋白的多克隆抗体.方法 构建pET28a-FAAP-His原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达His-FAAP融合蛋白,用纯化的FAAP蛋白免疫昆明小白鼠后,制备多克隆抗体,通过Western blotting检验抗血清的特异性和灵敏性.结果 成功构建pET28a-FAAP-His原核表达栽体.在大肠杆菌BL21中经1mM的异丙基-β -D-硫代半乳糖苷(isopropy-β -D-thiogalactoside,IPTG)37℃诱导4h后,融合蛋白有很高水平的表达.Western blotting结果显示FAAP抗体能够有效地检测人血管内皮脐静脉细胞内FAAP蛋白的表达.结论 成功地对FAAP进行了原核表达、纯化,抗FAAP小鼠的多克隆抗体具有较好的特异性,为进一步研究FAAP的结构与功能奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	63	817	17.0	27.0
2	丁乃峥	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	6	34	3.0	5.0
3	刘新发	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	7	50	4.0	7.0
4	王行明	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	6	6	1.0	2.0
5	郭红山	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	2	0	0.0	0.0
6	李镇安	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	2	0	0.0	0.0
7	郭海峰	中南大学生物科学与技术学院生物实验室	1	0	0.0	0.0