副溶血性弧菌的添加内标的PCR检测方法的建立及评价

• 作者: 刘弘 刘玥 崔林 张红芝 顾其芳
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 副溶血性弧菌 PCR检测 内标
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 微生物检测方法
• 页码范围: 921-924
• 页数: 4页
• 分类号: R378.3
• 语种: 中文

摘要

目的:建立并评价检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的添加内标(internal control,IC)的PCR方法.方法:利用生物信息学方法,分析副溶血性弧菌中特异基因toxR和tlh,设计引物toxR中900bp的特异序列为目的片段;tlh中522bp的特异序列为添加片段,利用复合引物法构建IC,建立PCR检测体系.结果:本研究成功构建添加IC的PCR检测体系,利用该体系对副溶血性弧菌和非副溶血性弧菌进行检查,结果显示,以副溶血性弧菌为模板的PCR反应可扩增到900饰和560 by的特异片段,而以非副溶血性弧菌为模板的反应扩增到一条560bp的IC片段.该方法对DNA灵敏度的检测极限是0.5 pg/μl,此时IC的最佳添加浓度是0.5fg/μl.并对多份水产品的检测结果也证实其能起到很好的指示假阴性作用.结论:添加内标的PCR方法能够准确检测水产品中副溶血性弧菌,排除假阴性干扰.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾其芳		4	0	0.0	0.0
2	张红芝		5	0	0.0	0.0
3	刘玥		2	0	0.0	0.0
4	刘弘		2	7	1.0	2.0
5	崔林		1	0	0.0	0.0