犬IL-2基因克隆及原核表达

• 作者: 毕聪明 白刃 苏禹刚 费东亮
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 犬 白细胞介素 2 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 饲料与动物科学
• 页码范围: 5898-5900
• 分类号: S829.2
• 字数: 2419字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.10.091

摘要

[目的]研究犬IL-2基因的克隆和表达,为开发新型免疫增强荆和基因工程疫苗提供理论支持.[方法]从犬全血中分离出白细胞,经刀豆素刺激培养20 h后,提取总RNA;根据GenBank 中犬IL-2基因序列,设计1对引物,进行PCR扩增,并构建原核表达载体pET-28a,将其转化到宿主菌B121中,经IPTG 诱导表达.表达产物用SDS-PAGE进行分析.[结果]RT-PCR 扩增出一条约500 bp的条带,与预期结果相符;重组质粒pMD18-T-IL2 经双酶切后,产生一个约500 bp基因片段,说明目的基因被成功克隆;表达载体pET-28a-IL2 经双酶切和PCR鉴定后,分别产生一个约500 bp目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE 分析,分子量约为20 kDa,与预期蛋白大小基本相同.[结论]IL-2基因被成功克隆和表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	费东亮	辽宁医学院畜牧兽医学院	48	134	6.0	8.0
2	苏禹刚	辽宁医学院畜牧兽医学院	31	56	5.0	6.0
3	白刃		6	42	4.0	6.0
4	毕聪明	辽宁医学院畜牧兽医学院	37	83	5.0	7.0