三元复合因子Net嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 倪培华 李百文
• 来源期刊: 诊断学理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 Net基因 克隆 293细胞
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 295-298
• 分类号: R446
• 字数: 2885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2870.2012.03.020

摘要

目的:克隆人三元复合因子Net全长基因,构建其重组腺病毒载体.方法:抽提正常人胰腺组织中总RNA,经RT-PCR扩增出全长Net基因,利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316- Net共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net,在293细胞中包装和扩增后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net.采用PCR和蛋白印迹法检测Net基因的表达.结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1224bp的cDNA片段,经测序证实为人Net基因.最终构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-Net.结论:成功克隆了人Net全长基因,并构建其重组腺病毒表达载体,为进一步研究人Net基因在相关肿瘤疾病中的生物学作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪培华	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系	104	442	10.0	13.0
2	李百文	上海交通大学附属上海市第一人民医院消化科	19	31	4.0	4.0