中华补血草ISSR-PCR体系的构建与正交优化

• 作者: 丁鸽 于延球 张代臻 张蓓蓓 赵玲玲
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 中华补血草 ISSR 反应体系 正交优化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 93-97
• 分类号: Q946
• 字数: 3816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2012.03.017

摘要

为获得中华补血草ISSR的最佳反应体系,采用正交试验设计,对影响ISSR反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行优化筛选.通过各因子的组合研究,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立了可用于中华补血ISSR - PCR分析的稳定可靠的反应体系:25 μL PCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2 mmol/L MgCl2,dNTP 100 μmol/L,模板DNA为20 ng,Taq聚合酶1.5U,随机引物0.4μmol/L,退火温度52℃～ 58℃.所建立的中华补血草ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点,可以较好地应用于中华补血草的遗传多样性及物种保护的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张代臻	江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室盐城师范学院	18	71	6.0	7.0
2	于延球	江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室盐城师范学院	4	17	2.0	4.0
3	张蓓蓓	盐城工学院化学与生物工程学院	7	12	2.0	3.0
4	丁鸽	盐城工学院化学与生物工程学院	16	50	4.0	6.0
5	赵玲玲	盐城工学院化学与生物工程学院	7	53	3.0	7.0