高效抑制O型口蹄疫病毒shRNA分子的筛选与验证

• 作者: 乔军 陈创夫 马铈委
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 RNAi shRNA序列 筛选
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 13-17,22
• 分类号: S852.652
• 字数: 4423字
• 语种: 中文

摘要

针对O型12蹄疫病毒（Foot—and—mouth disease veirus，FMDV）基因组高度保守的VP1和3D区段，选取了120个干扰靶位，根据RNAi技术原理，构建了包括对照在内的82个shRNA表达质粒；通过细胞攻毒试验，提取细胞毒液RNA，然后RT-PCR，最后real—time PCR检测病毒和shRNA的表达量。结果显示，干扰质粒组基因表达抑制率为63％～96．8％，其中pSiRe—Zs—VP1—54和pSiRe-Zs-3D-12等2个表达质粒抑制效率最好，分别为96．8％和87％，表明这2个表达质粒能够明显抑制FMDV的复制。