人源His-talin1原核表达载体的构建及其蛋白表达

• 作者: 吴爽 张娟辉 游娟
• 来源期刊: 解剖学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达 Talin基因重组 亲和层析 P-selectin
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-214
• 分类号: R322-33
• 字数: 2539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-0770.2012.03.012

摘要

目的 克隆人源talin1 cDNA,构建其高效原核表达载体,并纯化得到高纯度His-talin1融合蛋白.方法 PCR法扩增talin1基因并连接到原核表达载体pET32a(+),筛选和测序鉴定阳性克隆.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达和亲和层析分离纯化表达产物,对纯化的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 成功扩增了2.4kb的talin1基因,构建了pET32a(+)-talin1重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达出His-talin1融合蛋白.经SDS-PAGE和Western blot方法,验证了高纯度纯化的融合蛋白.结论 建立了高效稳定的His-talin1表达体系,为进一步研究Talin1蛋白的结构及其与P-selectin之间的关系打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	游娟	广东药学院基础学院生物化学与分子生物学教研室	15	19	2.0	3.0
2	吴爽	广东药学院基础学院组织胚胎学教研室	17	80	6.0	8.0
3	张娟辉	广东省武警医院妇产科	3	6	2.0	2.0