重组葡激酶的表达纯化及纤溶活性鉴定

• 作者: 周建中 杨可 杨震 汪德强 雷寒
• 来源期刊: 重庆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 葡激酶 表达纯化 体外活性
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 232-235
• 分类号: R541.4
• 字数: 3672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3626.2012.03.012

摘要

目的:构建葡激酶( Staphylokinase,SAK)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达SAK蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性.方法:基于生物信息学方法分析优化基因序列,使用基因合成技术合成SAK基因,转化感受态大肠杆菌B834菌株,使在其中表达,利用离子交换柱,分子筛(Superdex 75)等进行分离纯化,应用纤维蛋白平板溶圈法测定评价其生物活性.结果:SAK在大肠杆菌中以可溶上清的方式高效表达,利用离子交换柱和分子筛等纯化效果良好,纯度达95％,体外实验显示其纤溶活性与尿激酶标准品相当.结论:应用全基因合成经过优化的基因可在大肠杆菌系统中高效上清表达具有较高纤溶活性的SAK.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷寒	重庆医科大学附属第一医院心内科	188	1278	16.0	25.0
2	周建中	重庆医科大学附属第一医院心内科	52	418	10.0	18.0
3	汪德强	重庆医科大学感染病性疾病分子生物实验室	8	13	3.0	3.0
4	杨可	重庆医科大学附属第一医院心内科	1	6	1.0	1.0
5	杨震	重庆医科大学感染病性疾病分子生物实验室	1	6	1.0	1.0