重组葡激酶及其在大肠杆菌中高效表达与纯化

• 作者: 任斌 周青 智强 朱年春 赵丽萍
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 葡糖激酶/分离和提纯 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R378.21|R345
• 字数: 2302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2001.01.005

摘要

目的研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法用PCR方法扩增葡激酶cDNA，插入质粒pET-22b中构建成表达载体，转化入大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导表达，表达产物用Q-Poros和S-Sepharose纯化。结果经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒，体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达98%以上，SDS-PAGE和Western Blot实验证实该产物为葡激酶。结论成功构建了重组葡激酶表达载体，并经表达纯化获得高纯度葡激酶，为产业化和临床应用奠定了良好基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周青	安徽医科大学分子生物学实验室	64	338	10.0	14.0
2	智强		10	34	3.0	5.0
3	任斌	中国科学技术大学生命科学院	5	9	2.0	2.0
4	朱年春		4	10	2.0	3.0
5	赵丽萍		1	3	1.0	1.0