HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定

• 作者: 吴稚伟 宋红勇 楚鹰
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 V1V2 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 142-145
• 分类号: R392.11
• 字数: 3759字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.02.010

摘要

目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础.方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向克隆到多系统表达载体pTriEx-3 Hygro vector(Merck & Co.,Inc.)中,构建了表达质粒,并将表达质粒瞬时转染293T细胞,144小时后收获上清液,经浓缩、纯化后,SDS-PAGE电泳,Western blot检测蛋白的表达,ELISA检测其与HIV-1阳性病人血清的反应性.结果:经SDS-PAGE电泳、Western blot、ELISA方法证实确实得到了有免疫反应活性的V1V2蛋白,从表观分子量判断,表达的V1V2蛋白被糖基化修饰.使用V1V2蛋白作为抗原,分析发现中国HIV-1阳性病人体内比较广泛的存在着V1V2的抗体,为血清学的分析奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴稚伟	南京大学医学院公共健康医学中心	12	25	3.0	3.0
2	宋红勇	南京大学医学院公共健康医学中心	4	12	3.0	3.0
3	楚鹰	南京大学医学院公共健康医学中心	2	5	1.0	2.0