HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位

• 作者: 张丽 张旋 谷万港
• 来源期刊: 昆明医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: HIV-1 整合酶 细胞核 FITC
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 42-45
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.4
• 字数: 2370字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建重组基因表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN并观察其在Hela细胞中的表达．对HIV-1整合酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究．方法通过 PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN．以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞．细胞用4%的多聚甲醛固定以后，经过PI对细胞核染色，整合酶抗体跟整合酶反应以后，用FITC标记的二抗进行孵育，用共聚焦显微镜观测整合酶在细胞中的表达情况．结果经过定向克隆和测序鉴定证实，重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN构建成功．免疫荧光实验显示，Lipofectamine2000介导质粒转染Hela表达成功，整合酶主要定位在细胞核．结论 HIV-1整合酶真核表达载体构建成功，转染以后，整合酶表达并且主要定位在细胞核．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽	昆明医科大学学报编辑部	33	85	5.0	8.0
2	张旋	昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室	22	88	6.0	8.0
3	谷万港	遵义医学院基础医学院免疫学教研室	6	4	1.0	1.0