拟南芥中柯浩体蛋白Atcoilin的克隆、表达及纯化

• 作者: 张静 张飞云 朱文壮 田兆丰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: Atcoilin蛋白 表达 纯化 标志蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 63-68
• 分类号: Q943
• 字数: 3661字
• 语种: 中文

摘要

旨在制备柯浩体的标志蛋白-Awoilin蛋白,利用pET-28a与目的基因构建重组表达质粒,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用SDS-PAGE及Western blotting分析鉴定.通过分别改变IPTG的浓度、培养时间、培养温度等来优化Atcoilin蛋白的表达条件.表达出的重组蛋白经过镍柱、分子筛进行纯化.结果显示,原核表达载体pET28a-Atlg 13030成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相应的重组蛋白经Western blotting鉴定正确.在IPTG浓度为0.7 mmol/L,18℃培养20 h的条件下,目的蛋白表达量最高.经过SDS-PAGE分析鉴定,过镍柱、分子筛后得到的重组蛋白纯度较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张静	首都师范大学生命科学学院	40	90	6.0	8.0
2	田兆丰	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	32	223	8.0	14.0
3	张飞云	首都师范大学生命科学学院	23	111	6.0	9.0
4	朱文壮	首都师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0