乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究

• 作者: 刘建 徐健 曾智勇 李春燕 汤德元 王凤 罗险峰 马萍
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 贵州分离株 E基因 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1330-1336
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 6356字
• 语种: 中文

摘要

收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14- 14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19- T -E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET- 32a-E转化至宿主菌BL21 (DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDSPAGE电泳和Western blot分析,得到了约59 ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体.结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤德元	贵州大学动物科学学院	256	1165	16.0	26.0
2	曾智勇	贵州大学动物科学学院	205	619	12.0	17.0
3	李春燕	贵州大学动物科学学院	90	654	13.0	22.0
4	王凤	贵州大学动物科学学院	46	445	10.0	20.0
5	罗险峰		44	272	9.0	14.0
6	马萍		21	74	5.0	7.0
7	刘建	贵州大学动物科学学院	49	250	9.0	13.0
8	徐健	贵州大学动物科学学院	31	191	9.0	13.0