颅缝早闭症相关实验荧光定量PCR内参基因的选择研究

• 作者: Barry C Powell Jodie T Hatfield Peter J Anderson Susan J Hinze 杨娴娴 穆雄铮
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 颅缝早闭症 荧光定量聚合酶链反应 geNorm分析
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 140-145
• 分类号: Q786
• 字数: 5856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2012.03.005

摘要

目的 探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的最佳内参基因.方法 应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株.以常用的候选管家基因作为研究对象,利用 geNorm软件对RT -qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达最为稳定的管家基因作为内参.结果 Fgfr2C342Y/+c小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh- Canx为最佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为最佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为最佳组合.选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著.结论 在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	Jodie T Hatfield	阿德莱德5006澳大利亚颅颌面外科中心阿德莱德妇女儿童健康研究中心	1	1	1.0	1.0
2	Susan J Hinze	阿德莱德5006澳大利亚颅颌面外科中心阿德莱德妇女儿童健康研究中心	1	1	1.0	1.0
3	Peter J Anderson	阿德莱德5006澳大利亚颅颌面外科中心阿德莱德妇女儿童健康研究中心	1	1	1.0	1.0
4	Barry C Powell	阿德莱德5006澳大利亚颅颌面外科中心阿德莱德妇女儿童健康研究中心	1	1	1.0	1.0