艾洛替尼耐药肝癌HepG2细胞系的建立及其耐药机制

• 作者: 任志广 彭晖 李新颖 贾砚寒 赵青 马远方 魏寅祥 黎燕
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 艾洛替尼 肝癌 细胞系 耐药
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 823-828
• 页数: 6页
• 分类号: R979.1
• 字数: 4784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2012.06.008

摘要

目的 体外建立艾洛替尼(erlotinib)耐药的人肝癌细胞系HepG2/erlotinib,鉴定其生物学特性,并对其耐药机制进行初步探讨.方法 逐步递增艾洛替尼并最终给予艾洛替尼50μmol·L-1连续冲击HepG2细胞12个月,建立HepG2/erlotinib.磺酰罗丹明B法检测HepG2/erlotinib耐药倍数和耐药谱;测定细胞生长曲线并计算细胞增殖时间;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR和Western印迹法检测HepG2/erlotinib细胞乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因和蛋白的表达;流式细胞术检测细胞表面BCRP蛋白表达.结果 经过12个月艾洛替尼诱导的HepG2耐药细胞,艾洛替尼的IC50值为(72.3±6.1) μmol·L-1,艾洛替尼对正常HepG2细胞的IC50值为(10.6±0.3) μmol·L-1,耐药倍数为6.8±0.7,表明HepG2/erlotinib为艾洛替尼耐药细胞系.HepG2/erlotinib对顺铂、多柔比星、米托蒽醌和拓扑替康的IC50均大于正常HepG2细胞的IC50,表明产生交叉耐药性.HepG2细胞和HepG2/erlotinib细胞的群体倍增时间分别为(20.7±3.3)h和(26.7±1.2)h,耐药细胞倍增时间延长.与HepG2细胞相比,HepG2/erlotinib的S期细胞比例明显增高(P＜0.05),G0/G1期细胞比例明显降低(P＜0.01);HepG2/erlotinib细胞中BCRP基因和BCRP蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 建立的HepG2/erlotinib具有耐药细胞的特征和生物学特性,其耐药机制与BCRP蛋白表达增加有关.